2018年3月20日,Sensors and Actuators B: Chemical期刊(IF:5.667,一区)刊发了高丰雷课题组题为“Rolling circle amplification triggered poly adenine-gold nanoparticles production for label-free electrochemical detection of thrombin”的最新研究成果。该研究设计了一种基于滚环扩增(RCA)触发聚腺嘌呤产生并吸附金纳米粒子(AuNPs)用于检测凝血酶的新型无标记电化学方法。该法表现出优异的灵敏度和特异性,具有宽的线性范围和低的凝血酶检测限。
凝血酶是一种丝氨酸蛋白酶,在血液凝固中起重要作用。已知血液中凝血酶浓度水平的变化与各种凝血异常有关,并且它被认为是肿瘤诊断的生物标志物。因此,高灵敏度的凝血酶检测对于早期诊断,临床实践和疾病复发具有极其重要的意义。在此,我们设计了一种基于滚环扩增(RCA)引发聚腺嘌呤与金纳米颗粒的组合测定凝血酶(TB)的新方法。首先通过聚腺嘌呤与金的作用将适体1固定在金电极(GE)表面上作为捕获探针。随后,连有适体2的凝血酶与适体1结合,从而凝血酶和适体2沉积在电极表面上。传感器表面上适体2的片段作为引物与RCA模板杂交以启动RCA过程,其产生包含许多腺嘌呤的长DNA序列。随后,AuNPs被吸附在RCA产物的聚腺嘌呤上,导致AuNPs在电极表面上的聚集,通过记录对H2O2的电催化还原电流来测试该电化学传感器性能。该电化学检测方法具有高灵敏度和特异性,固有的简单性,便携性和低成本等优点。本研究所设计的无标记方法可以在不进行繁琐的修饰过程的情况下进行检测。此外,我们预计该程序可以扩展用于检测其他蛋白质,所以该检测方法在生物医学研究和临床诊断中的应用前景广阔。
文章链接:https://doi.org/10.1016/j.snb.2018.03.112.